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應用領域 | 醫療衛生,生物產業,制藥 |
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端粒長度檢測
端粒(Telomeres):是真核生物線性染色體末端的非編碼串聯重復性(TTAGGG)n陣列。端粒縮短是啟動細胞衰老的分子鐘。基于10萬人的研究表明,端粒長度與年齡相關,至此端粒長度成為衰老的重要標志物之一。2009年,諾貝爾生理學或醫學獎頒發給了端粒研究領域的三位科學家——Elizabeth、Carol和Jack,以表彰他們發現了端粒和端粒酶是如何保護染色體末端的機理。
端粒長度檢測技術主要分為TRF與Q-PCR兩種。上海翼和生物端粒長度檢測服務采用了自主研發的qPCR法,克服了單拷貝基因內參測量不準確、內參與端粒分管檢測到的孔間差異、缺乏中國人群的樣本數據庫等困難。翼和生物技術來源于上海東華大學合作研發的課題、并受到國際表型組計劃的開發支持,以單管雙重熒光高效率擴增,體系穩定性強,消除孔間差異,減小誤差,增設新型高拷貝內參基因,穩定性好與TRF結果一致。
應用領域:端粒相關疾病的篩查和診斷,人體衰老指標檢測,精準醫療研究與應用等。
端粒長度檢測服務原理:
實驗原理:
1、精確設計的多重PCR引物,從基因組DNA中端粒
2、優化的內參基因,使端粒與內參差值縮小
3、雙色熒光標記不同基因,使得單管可測
4、利用實時熒光定量PCR儀檢測擴增信號
5、根據Ct值與中國人群端粒長度數據庫,確定端粒長度
端粒長度檢測服務流程:
端粒長度qPCR技術比較:
服務優勢:
優勢 | 指標 | 優勢 | 指標 | |
樣本DNA濃度 | 20ng/ul | 均一性 | 新型高拷貝內參基因 | |
端粒數據庫 | 中國人群數千例 | 穩定性 | 與金標準TRF一致 | |
樣本數 | 1-10000份 | 重復性 | ~ |
樣本要求送樣要求:
1.基因組DNA樣本:DNA質量要求260/280吸光度值1.8-2.0之間,瓊脂糖電泳帶型不彌散;濃度要求:≥20ng/μl;體積:≥20μl。建議干冰郵寄,如無法采購干冰,可放置足夠量的冰袋。
2.血液樣本:血液樣本必須確保冷凍之后再保存和寄送,并確保抗凝血管/離心管蓋子旋緊并用封口膜密封。送樣量:體積>500ul,需用抗凝劑抗凝。送樣過程中請注意保持低溫,干冰或足量冰袋,防止DNA降解。血液抗凝劑不建議使用肝素,可以使用EDTA。
結果提供:
1、實驗報告,含實驗材料與方法,所用引物序列等等
2、結果匯總,Ct值與T/S值。備注:健康檢測僅提供年齡預測。
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