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如果您想要將抗體、多肽、完整蛋白質和功能性酶共價偶聯至磁珠表面時,請選擇 MyOne™ Tosylactivated甲米-磺既基磁珠。優化的抗體方向使這些微珠成為蛋白質和蛋白質復合物免疫沉淀的理想選擇。
蛋白質復合物免疫沉淀的理想選擇:
背景值低,抗體與微珠表面共價連接,使MyOne™ Tosylactivated甲米-磺既基磁珠 成為蛋白質和蛋白質復合物免疫沉淀(共免疫沉淀,共-IP)的選擇。溫和而快速的微珠磁性聚集和耗時極短的孵育(可能是由于快速的表面結合動力學)使 Dynabeads Tosylactivated 成為極不穩定或和/或瞬時(短暫)蛋白質復合物免疫沉淀的理想選擇。
Dynabeads Tosylactivated 微珠表面特性:
• 對-甲苯-磺酰基(Tosyl)基團
• 疏水、pH 中性
• 通過伯胺(NH2)或巰基(SH)基團共價結合
超快方案:
• 鑒定蛋白質復合物成員的時間以分鐘計而非小時
• 分離時間短,足以鑒定瞬時和不穩定復合物
• 鑒定長時間方案無法鑒定的結合伴侶
• 快速方案使已經極低的背景結合進一步降低
• 信噪比更大
應用:
• 蛋白質和蛋白質復合物的 IP
• 將功能性酶偶聯至微珠表面進行下游分析
• 將肽偶聯至微珠表面以鑒定結合物
純化具有以下特點的肽、蛋白質和酶:
• 瞬時穩定
• 結構完整
• 溫度穩定性差
• 具有天然構型且功能完好
偶聯過程概要:
通過過夜孵育所選配體和 Dynabeads Tosylactivated 實現共價偶聯。與 Dynabeads Tosylactivated 偶聯的配體通常包括肽和蛋白質(例如用于免疫沉淀或共免疫沉淀的抗體)。在中性至高 pH 值和 37°C 時發生偶聯。我們建議在 pH 值為8.5-9.5的條件進行偶聯,但是對于 pH 值穩定性差的配體,偶聯可以在 pH 值為7.4的其它緩沖液中進行。
配體偶聯步驟完成后,Dynabeads Tosylactivated 的實際表面包被即不再具有活性,因此非特異性結合較低。
每毫克微珠的結合能力:
隨配體而變化(例如 14-19µg IgG)
關于 Dyanbeads:
Dynabeads 是無孔單分散超順磁性微珠。它們在溶液中有很強的運動能力,使偶聯至微珠的配體可與全部樣品持續進行相互作用。將試管轉移至包含強磁場的管架上,超順磁微珠將吸附在管壁上。強磁場將微珠快速吸附至管壁,因此可以通過吸取輕松去除全部上清液。洗滌步驟與此類似。
不用于人體,僅用于科研