細(xì)胞成骨誘導(dǎo)

成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液配備與誘導(dǎo)操作： 
1、準(zhǔn)備含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液； 
2、在備好的α-MEM培養(yǎng)液中添加50μM 抗壞血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松； 
3、準(zhǔn)備6孔培養(yǎng)板，將P4細(xì)胞按照5×103個(gè)/平方厘米的規(guī)格接種于原始α-MEM培養(yǎng)液中； 
4、待細(xì)胞長(zhǎng)至基本融合后，更換上述制備完成的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液； 
5、每三天換液一次，細(xì)胞長(zhǎng)至7天時(shí)進(jìn)行堿性磷酸酶染色； 
6、二十八天后再進(jìn)行礦化結(jié)節(jié)的茜素紅染色。 
素紅染色方法介紹： 
1、去除細(xì)胞當(dāng)前使用培養(yǎng)液，使用PBS清洗兩次； 
2、使用10%甲醛室溫固定15分鐘，完成后使用重蒸餾水沖洗兩次； 
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素紅染色液，室溫孵育20min并輕微振蕩； 
4、清除掉沒有*結(jié)合的染料，用重蒸餾水漂洗并振蕩5min重復(fù)4次； 
5、傾斜放置2min,吸取多余的重蒸餾水；倒置顯微鏡觀察拍照記錄。 

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
客戶提供：
細(xì)胞種類和誘導(dǎo)分化細(xì)胞類型。

收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。

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