細胞成脂誘導
成脂誘導培養(yǎng)液配備與誘導操作:
1、配置FBS10%含量的HG-DMEM培養(yǎng)液;
2、在配制完成的HG-DMEM培養(yǎng)液中加入1μM地塞米松,10μg/ml胰島素,200μM吲哚美辛和0.5mM IBMX;
3、準備6孔培養(yǎng)板,將P4細胞按照2×104個/平方厘米的規(guī)格接種于原始HG-DMEM培養(yǎng)液中
4、待細胞長至基本融合后,更換上述制備完成的成脂誘導培養(yǎng)液培養(yǎng)2天,在用只含有10μg/ml胰島素的成脂維持培養(yǎng)液培養(yǎng)1天,如此交替循環(huán)培養(yǎng)至14天,使用紅油O染色。
紅油O染色方法介紹:
1、去除細胞使用的當前培養(yǎng)液,使用PBS清洗兩次;
2、27.5%甲醛室溫固定20分鐘;
3、重蒸餾水清洗3此,空氣中干燥;
4、加入0.5%的紅油室溫孵育一小時;
5、配制70%乙醇溶液清洗3次;
6、倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
實驗注意事項:
客戶提供:
細胞種類和誘導分化細胞類型。
收費標準/服務周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。
【本公司合作項目】
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