染色質(zhì)免疫共沉淀

服務簡介：

染色質(zhì)免疫共沉淀技術主要應用于驗證及探尋體內(nèi)環(huán)境中，蛋白質(zhì)和DNA的直接相互作用，旨在探索特定蛋白質(zhì)在DNA上的特定結合序列，常在研究轉(zhuǎn)錄調(diào)控以及組蛋白修飾中被應用到。

服務原理：

在活細胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)－DNA復合物，并將其隨機切斷為一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段，然后通過免疫學方法沉淀此復合體，特異性地富集目的蛋白結合的 DNA 片段，通過對目的片斷的純化與檢測，從而獲得蛋白質(zhì)與 DNA 相互作用的信息。

服務優(yōu)勢：

完善的實驗平臺：全進口的儀器試劑，高標準甲醇交聯(lián)、Bioruptor超聲打斷；
2. 專業(yè)的實驗流程：*的ChIP優(yōu)化流程，個性化實驗方案，IP效率高，高成功率（高于95%）；
3. 豐富的實驗經(jīng)驗：專業(yè)的ChIP服務部門，實驗人員從事ChIP實驗長達5年以上，上千次成功ChIP實驗經(jīng)驗，針對不同動植物組織有不同的前處理方式。
服務流程：
1、樣品準備：培養(yǎng)細胞(若樣品為組織，可先培養(yǎng)原代細胞)；固定，或者直接活細胞送樣。
2、細胞固定：此步驟目的為將結合在DNA上的蛋白用共價形式交聯(lián)在所結合的位點上，避免在之后的操作步驟中脫離丟失。直接將甲醛加入細胞培養(yǎng)液，搖晃固定10分鐘后，迅速加入2.5M甘氨酸解交聯(lián)5分鐘，PBS洗滌，刮下細胞。
3、超聲打碎： 此步驟目的為將長鏈的DNA打碎成200-1000bp的DNA片段。使用設備是超聲水浴鍋，EP管在冰水混合物中超聲，超聲后細胞懸液變得澄清透明。離心取上清。
4、免疫沉淀：此步驟是加入特異性抗體和對照IgG，和結合抗體的磁珠（或protein A/G）。經(jīng)稀釋后，超聲產(chǎn)物分成兩份，分別加入特異性抗體和對照IgG，輪轉(zhuǎn)過夜，第二天加入磁珠輪轉(zhuǎn)4小時。
5、洗滌：此步驟是減少非特異性結合。分別用稀釋緩沖液、低鹽溶液、高鹽溶液、氯化鋰溶液以及TE緩沖液洗滌共7次。用洗脫緩沖液在65℃洗脫過夜。
6、DNA純化：將洗脫的產(chǎn)物用DNA純化試劑盒純化，得到50ul純化產(chǎn)物，用于檢測ChIP結果。

收費標準/服務周期/提供結果：
詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。

【本公司合作項目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實驗，病理實驗，免疫學實驗，細胞實驗，動物實驗，蛋白組學實驗等，能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務！

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