凝膠遷移實驗EMSA

服務目的：

檢測待測樣品中特定目的核蛋白的轉錄調控活性。
服務原理：

蛋白質可以與末端標記的核酸探針結合，在瓊脂糖膠或非變性膠中電泳時這種復合物比無蛋白結合的探針在凝膠中泳動的速度慢，即表現為相對滯后。該方法可用于檢測DNA結合蛋白、RNA結合蛋白，并可通過加入特異性的抗體（supershift）來檢測特定的蛋白質，進行未知蛋白的鑒定。
服務材料：
試劑：核蛋白提取試劑盒、bradford法蛋白含量測定試劑盒、生物素標記 3’端 DNA試劑盒、Lightshift EMSA Optimization & Control Kit、化學發光法核酸檢測試劑盒。
儀器：恒溫培養箱、蛋白電泳儀、低溫冰箱。恒溫水浴箱、紫外交聯燈、振蕩器、脫色搖床。
服務方法：
1、核蛋白樣本提取與蛋白定量。
2、生物素標記DNA3’端并去吹TdT。
3、Super-Shift反應，配制6.5%聚丙烯酰胺凝膠，配制好各反應體系，EMSA室溫結合反應20min，電泳上樣。
4、電轉膜，操作方法同常規Western blot轉膜操作。
5、紫外交聯，將核酸交聯于PVDF膜上。
6、化學發光法檢測生物素標記的探針。

客戶提供：
1、客戶提供組織、細胞，公司提取核蛋白并進行蛋白濃度測定；
2、客戶提供核蛋白，公司進行蛋白濃度測定；
3、客戶提供已知濃度的核蛋白，公司進行EMSA實驗。
交付內容：
樣品質檢報告、實驗數據分析、實驗方法及樣品EMSA電泳圖。

收費標準/服務周期/提供結果：
詳談，我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。

【本公司合作項目】
慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實驗，病理實驗，免疫學實驗，細胞實驗，動物實驗，蛋白組學實驗等，能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務！

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