熒光標記的Pro5®MHC I類五聚體用于識別抗原特異性CD8+T淋巴細胞。多聚體MHC肽復合物與具有特定特異性的T細胞受體（tcr）結合（由MHC等位基因和肽組合決定）。用Pro5®MHC五聚體染色的CD8+T細胞可通過流式細胞術進行分析，并確定抗原特異性T細胞的頻率。細胞內細胞因子（如IFNγ/IL-2）或表面標記物（如CD69/CD45RO）的額外共染色可提供抗原特異性亞群的額外功能數據。

僅供研究使用。不用于治療或診斷程序。

濃度：在PBS中，Pro5®五聚體濃度約為0.05 mg/ml

儲存條件：4°C。避光。不要凍住。

保質期：6個月，如果按照上述說明儲存。

熒光色素：別藻藍蛋白（APC）在650 nm處激發，在660 nm處發射（FL-4）。

胞染色方案所需附加材料：洗滌緩沖液（0.1%牛血清白蛋白，PBS中0.1%BSA），固定液（1%胎牛血清，2.5%甲醛PBS），抗CD8抗體，抗CD19抗體（可選†）。

1.在冷凍微型離心機中以14000×g離心5分鐘。這將去除導致非特異性染色的蛋白質聚集體。保持試劑不被冰覆蓋，直到需要。在進行染色試驗時，不要吸入顆粒集料的任何部分。

2.每個染色條件下分配1-2×106個淋巴細胞（PBMCs或脾細胞）。由于抗原特異性T細胞的頻率較高，在使用T細胞克隆或系時，每個染色條件下只分配2-5×105個細胞。

3.用2 ml洗滌緩沖液清洗電池，并在剩余體積（~50μl）中重新懸浮。在接下來的所有步驟中，除另有說明外，保持管在冰上冷卻。

4.向電池中添加一個熒光標記的Pro5®MHC五聚體測試（10μl），并充分混合。

5.在室溫（22°C）下培養10分鐘，避光。

6.用2ml洗滌緩沖液沖洗細胞，并在剩余體積中重新懸浮。

7.向細胞中加入抗CD8和抗CD19抗體，混合均勻。†建議使用抗CD19抗體，以排除B細胞的非特異性染色。

8.在冰上孵育20-30分鐘，避光。

9.用2ml洗滌緩沖液沖洗細胞兩次，在加入200μl固定液之前，再次*沖洗。在黑暗中保存在固定溶液中直到分析。五聚體陽性細胞的觀察方法是先對CD19陰性的活淋巴細胞進行門控，然后在雙色圖上分析，顯示x軸上的CD8和y軸上的五聚體。

產品名稱：ProImmune 廣州代理商-APC 多聚體

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ProImmune位于英國牛津，是世界上MHC五聚體和單體的主要供應商。除提供重組MHC外，ProImmune還是為客戶合成 MHC-Peptide化合物的專業公司，它能根據客戶所提供的肽序列，為客戶合成特殊的MHC-Peptide化合物。此外為方便廣大客戶，ProImmune還提供MHC Tetramer (R-PE) + Anti-CD8 (FITC) 試劑盒。英國ProImmune公司是免疫學功能檢測多聚體產品和服務*的。ProImmune的早期產品包括Pro5®MHC Pentamer，用于檢測表位特異性免疫細胞，以便可以在人體血液樣本中進行分析。Pentamers以及2016年推出的ProT2®MHC II類四聚體繼續成為ProImmune核心業務的一部分，并不斷壯大，已有1400多個同行評審出版物引用了這些產品的使用。產品包括重組的MHC Class I五聚體和MHC Class II六聚體，用于特異性的T細胞免疫功能檢測。廣泛用于腫瘤，傳染性疾病，自身免疫學疾病和移植等熱門領域的基礎，新藥和臨床研究。

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重慶市華雅干細胞技術有限公司于2013年成立于重慶市北部新區，注冊資金200萬，是中國中西部地區家專業從事生物技術產品銷售、干細胞基礎研究、臨床應用研究及干細胞技術服務的生物高科技企業。

重慶市華雅干細胞技術有限公司(HY StemCell)是一家專業從事干細胞基礎研究、干細胞再生醫學臨床應用研究及干細胞技術服務的生物高科技企業。華雅干細胞公司下設：干細胞技術研發部、干細胞產品營銷部、生物試劑耗材儀器營銷部三個核心事業部門，以及輔助公司運營的財務部、物流部、人事行政部等。

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