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目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>基因組和質(zhì)粒提取試劑盒>> D6942基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒

基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
  • 基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 品牌
  • 型號(hào) D6942
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地 北京市
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更新時(shí)間:2024-08-24 10:15:25瀏覽次數(shù):1542評(píng)價(jià)

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基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
貨號(hào):D6942
規(guī)格:100T
質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒主要存在于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中,它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。

基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒
貨號(hào):D6942
規(guī)格:100T


產(chǎn)品說明:
    質(zhì)粒(Plasmid)是一種染色體外的穩(wěn)定遺傳因子,大小從1-200kb不等,為雙鏈、閉環(huán)的DNA分子,并以超螺旋狀態(tài)存在于宿主細(xì)胞中。質(zhì)粒主要存在于細(xì)菌、放線菌和真菌細(xì)胞中,它具有自主復(fù)制和轉(zhuǎn)錄能力,能在子代細(xì)胞中保持恒定的拷貝數(shù),并表達(dá)所攜帶的遺傳信息。


質(zhì)粒提取原理及流程:
    較常用的質(zhì)粒DNA提取方法有3種:堿裂解法、煮沸法和去污劑(如Triton和SDS)裂解法。前兩種方法比較劇烈,適用于較小的質(zhì)粒(<15kb)。去污劑裂解法則比較溫和,一般用于分離大質(zhì)粒(>15kb)。堿裂解法是一種應(yīng)用為廣泛的制備質(zhì)粒DNA的方法,其原理為:染色體DNA比質(zhì)粒DNA分子大得多,且染色體DNA為線狀分子,而質(zhì)粒DNA為共價(jià)閉合環(huán)狀分子;當(dāng)用堿處理DNA溶液時(shí),線狀染色體DNA容易發(fā)生變性,共價(jià)閉環(huán)的質(zhì)粒DNA在回到中性即恢復(fù)其天然構(gòu)象;變性染色體DNA片段與變性蛋白質(zhì)和細(xì)胞碎片結(jié)合形成沉淀,而復(fù)性的超螺旋質(zhì)粒DNA分子則以溶解狀態(tài)存在液相中,離心去除沉淀后,就可從上清中回收質(zhì)粒DNA。目前,市面上質(zhì)粒提取試劑盒大多數(shù)都是采取上述的堿裂解方法,不同之處在于純化方式。目前比較常用的純化系統(tǒng)是硅基質(zhì)吸附材料,其原理為在高鹽環(huán)境下質(zhì)粒DNA能夠結(jié)合到硅基質(zhì)上,然后用低鹽緩沖液或水將質(zhì)粒DNA從硅基質(zhì)上洗脫下來。得到的質(zhì)粒可以用于酶切、PCR、測序、細(xì)菌轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。


質(zhì)粒鑒定與評(píng)價(jià):
瓊脂糖電泳檢測
    堿裂解法提取的質(zhì)粒經(jīng)瓊脂糖電泳進(jìn)行鑒定時(shí),理想狀況是只出現(xiàn)超螺旋—條帶,但在質(zhì)粒提取過程中,由于機(jī)械力、酸堿度、試劑等原因,使質(zhì)粒DNA鏈發(fā)生斷裂,可能出現(xiàn)兩條帶或者出現(xiàn)三條帶,這三條帶電泳遷移率從快到慢,分別是超螺旋、開環(huán)和復(fù)制中間體(即沒有復(fù)制*的兩個(gè)質(zhì)粒粘連在—起)。如果加溶液Ⅱ后過度振蕩,會(huì)在遠(yuǎn)離這三條帶的位置出現(xiàn)條帶,這條帶泳動(dòng)得較慢,是大腸桿菌基因組DNA的片斷。非常偶然的是,有時(shí)候提取的質(zhì)粒會(huì)出現(xiàn)4個(gè)以上的條帶,這是由于特殊的DNA序列導(dǎo)致了不同程度的超螺旋(超螺旋的圈數(shù)不同)所致。但是,只要質(zhì)粒經(jīng)單酶切鑒定后,只有單一條帶,就證明沒有基因組的污染。酶切檢測質(zhì)粒提取后,為了進(jìn)—步鑒定質(zhì)粒的正確與否,就要進(jìn)行酶切鑒定,通過與Marker對(duì)比,確定質(zhì)粒的分子量大小。用紫外線分光光度計(jì)檢測濃度測定標(biāo)準(zhǔn)為:OD 260 值為1相當(dāng)于大約50ug/ml雙鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值1.7-1.9之間說明所得DNA純度較好。OD 260 /OD 280 比值若低于1.7說明可能有蛋白污染。OD 260 /OD 280 比值若高于2.0則說明DNA有可能已降解。如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H值和離子濃度會(huì)影響光吸收值,但并不表示純度低。

 

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基因組提取試劑盒 質(zhì)粒提取試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價(jià)格會(huì)因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動(dòng)以訂貨當(dāng)日新價(jià)格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時(shí)間為16點(diǎn)整,部分城市可到17點(diǎn)整,因超過截止時(shí)間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請(qǐng)辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


運(yùn)輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實(shí)密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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