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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒
貨號:D2400
規(guī)格:50T、100T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期 12 個月,2℃-8℃保存時間更長 。
產(chǎn)品說明:
本試劑盒適合于從血清、細胞上清、淋巴液中提取 DNA 病毒基因組,不適合于 RNA 病毒基因組的提取。使用本試劑盒提取的基因組 DNA 可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實驗。
產(chǎn)品包裝:
操作步驟:
使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1、 取病毒上清液 0.5ml,12000rpm 離心 5min,盡量吸盡上清使用,棄去沉淀。
2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K, 充分混勻, 65℃消化 10-20min, 期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3、 向管中加入 500ul 結(jié)合液,充分混勻。再向管中加入 400ul 無水乙醇,充分混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響DNA 的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,靜置 2min。 (吸附柱的大容積為 750ul,可分兩次加入。一次吸附完離心后再將余下的混合液體加入柱中靜置離心。 )
4、 12000rpm 離心 2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
5、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
6、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
7、 12000rpm 離心 2min,將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等。
8、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加 50ul-100ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置 5min,12000rpm 離心 1min。
9、 離心所得洗脫液再加入吸附柱中, 室溫放置 2min, 12000rpm 離心 2min, 即可得到高質(zhì)量的病毒基因組 DNA。
注意事項:
1、試劑盒拆封后,蛋白酶K需放置-20℃保存。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會導致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
3、若結(jié)合液中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解再使用,不影響效果。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,體積過小會影響回收效率。洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)此范圍),pH 值低于7.0會降低洗脫效率。DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。
5、DNA濃度及純度檢測:得到的基因組DNA片段的大小與病毒的保存條件和種類等因素有關(guān)。D 260 值為 1.0 相當于大約 50 ug/ml雙鏈DNA、40 ug/ml單鏈DNA。OD 260 /OD 280 比值應(yīng)為 1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。
6、如果病毒含量過低,后提取的基因組DAN電泳可能無法檢測到,但PCR等其他實驗還會有結(jié)果。
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基因組提取試劑盒 DNA病毒基因組提取試劑盒訂購說明:
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
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運輸說明:
1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護航。
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