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根據賓夕法尼亞大學佩雷??爾曼醫學院的一項新研究,隨著細胞老化,它們排出有害垃圾的能力下降。研究結果表明,老年神經元中自噬的惡化-從未復制過的細胞和它們所居住的尸體一樣古老-可能是一系列神經退行性疾病(如肌萎縮側索硬化癥,阿爾茨海默氏癥)的危險因素,和帕金森氏癥。使用來自年輕和老年小鼠的神經元的活細胞成像,生理學教授ErikaHolzbaur博士和作者,Holzbaur實驗室的博士后研究員AndreaStavoe博士本周在eLife上發表了他們的研究。自噬的重要性在2016年被諾貝爾生理學或醫學
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酶聯免疫吸附法(ELISA)由于其易于操作,可以簡單地回答樣本中有多少蛋白質/多肽/抗體這一基本問題,是實驗室比較常用的一種檢測方法。而這種簡單的分析方法的核心,就是標準曲線。沒有它,我們的實驗就變成了一個二元的“是/不是”測試。有了它,我們可以深入研究生物反應的細節。那么,是什么使得標準曲線如此強大呢?讓我們在ELISA的背景來討論這個問題。簡單地說,標準品就是一系列已知目標蛋白數量的陽性對照。例如,如果對人類IgG進行ELISA檢測,標準曲線將包含逐漸減少的已知量的人類IgG,它會讓你立刻得
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辛辛苦苦提完RNA,逆轉錄后一個個孔加完引物和模板,Z后進行RT-PCR,你以為這樣就可以美滋滋地坐等結果了?等到一幅下面這樣的結果圖,不知道對于剛接觸RT-PCR的你來說內心是否是崩潰的?這是啥?怎么看?別急,讓我慢慢跟你介紹,看完后你就能準確的分析出你的RT-PCR結果了。「這里以7500軟件為例進行介紹」1.首先設置好內參和對照組「在AnalysisSettings處」,一般我們在上機前會對應設置好的,如果設置好的話可以直接跳至第3點。如果沒有設置好的話是需要重新進行設置。2.點擊進去后,
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實驗方法原理基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應做準備;②模板DNA與引物的退火(復性):模板DNA經加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合;③引物的延伸:DNA模板--引物結合物在Taq酶的作用下,以dNTP為
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巴氏芽孢桿菌(Bacilluspasteurii)產脲酶,尿素酰胺水解酶,近來受到很多研究人員追捧,那如何培養這菌株成了很多大家關注的問題,下面就一一詳細介紹巴氏芽孢桿菌如何培養說明巴氏芽孢桿菌培養溫度:30℃培養時間:18-24小時培養基:.CASOAGAR+尿素(20克/升)酪蛋白胨15克大豆蛋白胨5克氯化鈉5克瓊脂20克蒸餾水1升PH7.3斜面菌種和凍干菌種應在2-8℃保存。凍干活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.1-0.2ml的培養液或者無菌水溶解,接種在2支斜面上,因凍干菌種處于休眠
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在整個PCR體系中,引物占有十分重要的地位。PCR的特異性要求引物與靶DNA特異結合,不與其他非目的的DNA結合,PCR的靈敏性要求DNA聚合酶能與引物進行有效的延伸,可見引物設計好壞與PCR結果密切相關。一、PCR引物設計原則1、引物長度一般在15-30bp引物長度一般為15-30bp,常用的為18-27bp,但不應大于38bp,因為過長會導致其延伸溫度大于74℃,不適于TaqDNA聚合酶進行反應;2、引物GC含量一般為40%-60%引物GC含量一般為40%-60%,以45-55%為宜,GC含
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流式結果圖有4種類型,分別為:1.直方圖2.散點圖3.等高線圖4.密度圖下面一一為大家介紹1.直方圖(Histograms)a.橫坐標代表熒光信號或散射光信號相對強度,可以是線性或對數坐標。b.縱坐標一般是相對細胞數。直方圖適用于分析處理周期(如下圖)直方圖分析數據注意事項:①不能比較不同標記之間的表達量。如一號樣本單標記CD133、二號樣本單標記CD44,那么CD133與CD44表達量不能用直方圖進行比較。②直方圖的形狀(直方圖的高度及寬度)取決于儀器的類型、處理軟件和樣本③檢測目的細胞非常少
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一、實驗過程中需要注意的問題①蛋白樣品的提取及蛋白含量的檢測蛋白樣品的提取咱們*是按照試劑盒說明書來做的,步驟沒有什么講的,但是因為蛋白樣品的好壞直接決定了是否能做出來蛋白條帶,這就好比蓋房子所需要的磚頭一樣,一定要務必認真。②儀器準備清洗玻璃板:玻璃板的正確拿法應該是拿住玻璃板的左右兩側不要用手拿上下兩端,避免手套上面的臟東西順著水流流到玻璃板上,玻璃板請一定務必清洗干凈,不干凈的玻璃板上面的殘留物可能會影響凝膠之間的化學反應,導致膠出現問題,對后面的結果影響很大。玻璃板放置:玻璃板底部對齊,