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軟瓊脂(softagar)實驗一般用來檢測細胞的集落形成能力?,F在這種方法越來越多的用于分離癌細胞,也可以用來確認癌細胞是否具有癌化特性,為進一步做腫瘤小鼠移植模型奠定理論基礎。該方法看似簡單,但如果細節掌握不好,往往導致實驗失敗或數據缺乏說服力。如果你曾經在這個實驗上栽了跟頭,請不妨在如下幾個方面進行嘗試:1.要確保在整個實驗過程中所使用的瓊脂處于*液體狀態(80℃),尤其是在做基底時,如果瓊脂凝固過快會導致基底不均一;2.做瓊脂基底是應避免產生小氣泡,一旦有小氣泡產生,應該立即將氣泡趕走;3
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剛復蘇的細胞狀態不好,有許多死細胞,頻繁換液好嗎?大致如題,有一些人認為細胞剛復蘇不能狗頻繁的換液,說是細胞會自己分泌細胞因子維持自己的生存,換液的話,就會影響細胞的生長,長的不好,但是我的細胞狀態不好而且有很多細胞碎片,細胞死亡之后在培養基中會不會釋放很多的有毒物質,對細胞的生長不利,所以就想要換液把死細胞和細胞碎片都洗掉,目前不知道怎么選擇,所以想請大家給一下就參考意見?能洗掉的就洗,洗不掉的也不用刻意的用力吹,正如你所說的細胞密度小,可能會損害細胞。換液的話還是2~3天換,不要每天都換液。
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基礎篇-無菌操作基本技術1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管
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近看到不少問有關細胞培養污染的事,正好我看到了一個有關這方面的總結,很全很好很強大,跟大家分享下細胞培養中常見的污染情況總結如下:常見的污染如下:1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品,連續兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象!可在培養液中加相應的抗生素處理
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1、熒光免疫測定技術的概念:將試劑抗原或試劑抗體用熒光素進行標記,試劑與標本中相應的抗體或抗原反應后,測定復合物中的熒光素,這種免疫技術,稱為免疫熒光素技術。2、熒光的產生:物質吸收外界能量而進入激發狀態,在回復基態時多余的能量以電磁輻射的形式釋放,即發光,這種光稱為熒光。這種物質,稱為熒光素。由光激發所引起的熒光,為光致熒光------熒光免疫技術由化學反應所引起的熒光,為化學熒光------化學發光技術3、熒光素的熒光特性:⑴停止供能,熒光現象隨即終止⑵對光的吸收和熒光的發射具高度選擇性,綠
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一般我們購買商品化的primaryantibody的時候,抗體的說明書中都會給我們一個推薦的抗體使用濃度。這個濃度在一定程度上來說,是過飽和的,可以滿足大多數實驗的染色需求。但是因為是過飽和的濃度,這就帶來了一定程度的抗體浪費。而過量的抗體,也會大大提高樣本的自發熒光。從另一個角度來看,因為廠家給出的推薦濃度都是基于一個特定的樣本濃度和樣本體積,所以在一些特殊的實驗中,比如樣本濃度或樣本體積過大的實驗,推薦的濃度就無法達到飽和滴加的要求。在這樣的前提下,推薦實驗用戶針對自己的實驗要求,zui好可
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1.實驗進行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風扇運轉10分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,且即使培養基相同亦不共享培養基,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應讓無菌操作臺運轉10分鐘以上后,再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時
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MEM細胞培養基細胞培養是實驗室里常見和基本的實驗了,但卻不是簡單的。別小看細胞培養,這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好,轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。經典的培養基有很多種,Invitrogen(GIBCO)、ThermoFisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應用廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養?!鬗EM是由Eag