支原體在自然界廣泛存在,尤其可以寄生于人、哺乳動物、植物、昆蟲等物種。人的口腔、鼻腔、皮膚、呼吸道等均可攜帶支原體。在細胞間里,支原體對培養細胞的污染風險不容忽視,這不僅因為常規的抗生素對支原體無效,而且因為污染早期也沒有顯著表現。一旦發生污染,支原體會影響細胞基因表達和營養代謝改變,嚴重干擾實驗結果(包括細胞轉染和病毒包被)。可以使用支原體清除劑。支原體清除劑的工作濃度:
1.將支原體清除劑添加到被支原體污染的細胞培養物中,濃度建議為5g/ml,并培養1周;
2.只有當推薦濃度對去除支原體無效時,才能將支原體去除劑濃度提高至10g/ml;
3.對于培養基更換或培養物轉移(傳代),使用含有相同濃度支原體清除劑的培養基;
4.在不使用支原體清除劑的情況下轉移細胞培養物數次,并確認污染支原體沒有再生。
支原體清除劑的細胞毒性較低,但是,當用支原體去除劑處理時,高度受支原體污染的細胞培養物可能會表現出細胞特性的改變或對細胞毒性抗生素的敏感性,因此,在這些情況下,建議在處理后檢查預期的細胞特性。