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四氯化碳肝臟纖維化小鼠模型氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除巨噬細胞實驗方案

時間:2024-5-31閱讀:428

肝纖維化是一種慢性肝病在修復(fù)過程中的病理狀態(tài),其中慢性肝病包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、膽汁淤積性肝炎以及某些代謝性疾病等。研究表明,肝纖維化作為所有慢性肝病的共同病理階段,是肝硬化甚至肝癌發(fā)展的必經(jīng)階段。大量研究證明,適當?shù)闹委煷胧┛赡孓D(zhuǎn)肝纖維化和早期肝硬化病理狀態(tài),控制肝纖維化的發(fā)展對于肝硬化甚至肝癌的防治具有至關(guān)重要的作用。因此,逆轉(zhuǎn)肝纖維化的治療成為眾多慢性肝臟疾病治療的匯聚點。

慢性肝損傷暴露于纖維化,其終末期肝硬化與危及生命的并發(fā)癥有關(guān)。盡管肝硬化長期以來一直被認為是不可逆的,但來自慢性肝病患者和小鼠模型的數(shù)據(jù)已經(jīng)明確表明,在消除根本原因后,纖維化甚至可以在后期恢復(fù)。然而,在許多情況下,這一目標無法實現(xiàn),這凸顯了對阻止進展和/或促進已建立的纖維化/肝硬化的消退的治療的迫切未滿足需求。去除或消除病原體可促進炎癥和促纖維化反應(yīng)的抑制,以及纖維化細胞的失活和/或消失,導(dǎo)致肝纖維化的消退。在免疫細胞中,肝巨噬細胞的不同亞群在控制纖維化進展和消退中起著雙重作用。特別是,來自人類樣本和實驗小鼠模型的數(shù)據(jù)表明,在肝損傷期間,具有高表達 Ly6C 的募集單核細胞衍生巨噬細胞 (MoMac) 分泌促炎和促纖維化細胞因子,從而延續(xù)纖維化反應(yīng)。相比之下,小鼠模型研究表明,在纖維化消退期間,具有 Ly6Clo 表型的恢復(fù)性 MoMac 群體會促進疤痕退化。因此,控制促纖維化與恢復(fù)性巨噬細胞平衡被認為是促進纖維化消退的有吸引力的策略。

四氯化碳法誘導(dǎo)肝纖維化模型的原理屬于氧化應(yīng)激反應(yīng),機制是四氯化碳在肝臟內(nèi)代謝生成三氯甲基自由基,產(chǎn)生的自由基誘發(fā)脂質(zhì)過氧化反應(yīng),生成的過氧化物包括丙二醛和4-羥基壬烯酸,它們以線粒體為靶點,破壞線粒體膜結(jié)構(gòu),從而損傷肝細胞膜,激活肝星狀細胞(hepaticstellatecell,HSC)釋放Ⅰ型膠原酶和Ⅳ型膠原酶,促進HSC增生,導(dǎo)致肝纖維化。

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對于慢性模型,持續(xù)時間比較長,如何在合適的時間點使用荷蘭Liposoma的巨噬細胞清除劑Clodronateliposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除單核巨噬細胞就顯得很關(guān)鍵,相對于試劑成本,慢性模型的時間成本更可貴。如何參考相關(guān)的文獻,就很迫切。Nature Communications的MAIT cell inhibition promotes liver fibrosis regression via macrophage phenotype reprogramming的文獻值得參考。

首先,作者做出來單核巨噬細胞在模型里面的動態(tài)曲線。

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其次,以四氯化碳模型為基礎(chǔ),聯(lián)合研究的目的分子,設(shè)計合適的注射Clodronateliposomes的timeline。

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最后,為了增加實驗結(jié)果的公信力,作者使用了荷蘭Liposoma的巨噬細胞清除試劑(貨號CP-005-005)。靜脈注射,劑量10ul/g體重。

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荷蘭Liposoma的Clodronateliposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體巨噬細胞清除試劑(貨號CP-005-005)產(chǎn)品圖片。

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