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腫瘤動物模型

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更新時間:2024-01-12 10:43:20瀏覽次數:493次

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腫瘤動物模型:常用見的動物實驗是腫瘤動物模型的構建,一般包括小鼠移植瘤模型和轉基因動物模型。轉基因動物模型則是引入致癌基因或敲除抑癌基因建立自發腫瘤或誘導生成腫瘤的轉基因模型小鼠,再在模型小鼠的基礎上進行相應的實驗。

腫瘤動物模型第一類是皮下移植瘤


顧名思義,這種模型的建立是將腫瘤細胞或腫瘤組織直接種植在小鼠的皮下。種植的點也有講究,一般選擇血運淋巴回流豐富的腹股溝和腋窩。可根據實驗設計選擇移植點,統一移植點的位置,除了遵守實驗統一的條件外,待腫瘤成熟后收集腫瘤時留下照片證據也顯得美觀。


裸鼠(Balb/c 鼠, 無毛發, T 淋巴細胞缺陷)是比較常見和常用的實驗用鼠,尤其是在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的優點。當然,這種腫瘤模型也有缺陷,即不能很準確的模擬正常人體腫瘤發生發展的過程。


腫瘤動物模型腫瘤細胞移植時的簡要步驟


首先準備好要移植的腫瘤細胞(細胞量根據不同腫瘤略有不同,我們所用的前列腺癌細胞系每個移植點一般選擇 1x106 左右;腫瘤細胞可與基質膠 1:1 混勻后用 1 ml 注射器吸取,基質膠能夠給腫瘤細胞提供營養環境,有助于腫瘤細胞生長)。


戴無菌手套后,將小鼠用左手大拇指和食指捏住頸部皮膚,然后將鼠尾用左手無名指和小指固定于左手大魚際。將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次。右手持吸有腫瘤細胞和基質膠混合液的注射器,在腹股溝或腋窩的位置,45 度斜角進針,注意不要突破腹膜,將針頭保持于皮下位置。


然后近水平位置將針頭幾乎wan全插入皮下,將混有基質膠的腫瘤細胞注射入皮下(腫瘤細胞量約 1x106),快速退針,左手食指輕壓針孔約 1 min 后將小鼠放回飼養籠中,注意將小鼠側放于墊料上,放置其不適嘔吐時嘔吐物誤入呼吸道引起窒息。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。


如果是利用腫瘤組織(人體腫瘤標本或小鼠移植瘤傳代)建立裸鼠皮下移植瘤模型,則需要首先將腫瘤組織用無菌 PBS(或 1640 培養基)洗滌 3 次,然后在無菌平皿上切成或用無菌剪刀剪成<1 mm3 體積的小塊(種植前可裹基質膠)備用。


將小鼠用水he氯醛麻醉后平臥于解剖板上,四肢用膠帶固定,將腋窩或腹股溝用 75% 酒精消毒 3 次,然后用眼科剪剪開約 0.5 cm 小口,小鑷子將皮下筋膜與皮膚分開,然后將腫瘤組織放入貼近腹股溝或腋窩的深部,每個位置放置 2~3 塊腫瘤組織,注意不同組間統一放置腫瘤組織塊數以保持一致。


然后縫合皮膚,消毒后將小鼠側臥位放置于飼養籠的墊料上。2~3 h 后觀察小鼠是否蘇醒。


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