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桿粒提取試劑盒 (Bacmid Extraction Kit)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100次/200次 |
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貨號 | 10123 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
主要用途 | 適用于大量從DH10Bac轉化株提取重組桿粒pFastBac |
產品名稱:桿粒提取試劑盒 (Bacmid Extraction Kit)
產品貨號:10123
產品規格:100 次/200 次
產品簡介:
桿粒提取試劑盒 (Bacmid Extraction Kit)適用于大量從DH10Bac轉化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進行轉染。
產品內容:
產 品 名 稱 | 100 次 | 200 次 | 儲 存 條 件 |
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Solution 1 | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
Solution 2 | 30ml | 60ml | 室 溫 |
KAC | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
End Solution | 4ml | 8ml | 2-8℃ |
操作步驟:
1. 5ml 離心管 12000rpm 離心 1min 收集細胞。
2. 真空吸干上清,0.3ml 的 Solution 1 重懸沉淀,輕輕地震蕩或上下混勻。
3. 0.3ml 的 Solution 2 輕輕混勻,室溫孵育 5min。注意:懸浮的沉淀應該從渾濁到幾乎半透明。
4. 緩慢加入 0.3ml KAC,加入過程中輕輕混勻,冰上放置 5-10min。
5. 12000rpm 離心 10min。
6. 輕輕將上清轉移到含有 0.8ml 異丙醇的離心管,不要吸到白色沉淀,顛倒混勻,冰上孵育 5-10min。
7. 室溫 12000rpm 離心 15 min。
8. 小心棄去上清,不要浮起沉淀,加入 0.5ml Wash Buffer,顛倒離心管數次清洗沉淀。
9. 室溫 12000rpm 離心 5 min。重復 8 和 9。
10. 輕輕吸棄上清,室溫 5-10 min 干燥沉淀,不要過分干燥。注意:勿使用真空離心選裝蒸發儀去干燥 DNA。
11. 40μl End Solution重新溶解DNA沉淀,為避免剪切,勿機械重懸DNA,讓溶液順管子輕輕流下溶解DNA。
注意事項:
1. 不*純化的桿粒 DNA 存在-20℃,因為反復凍融會剪切 DNA。
2. 分析重組桿粒 DNA(PCR 鑒定重組桿粒 DNA)或轉染昆蟲細胞。
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