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桿粒提取試劑盒 (Bacmid Extraction Kit)
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100次,200次 |
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貨號 | 10123 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
產品貨號:10123
產品規格:100 次/200 次
產品簡介:
桿粒提取試劑盒(核酸提取純化相關)適用于大量從DH10Bac轉化株提取重組桿粒pFastBac。純化后的桿粒DNA使用PCR檢驗或者進行轉染。
包裝清單:
產品名稱 | 100 次 | 200 次 | 儲存條件 |
Solution 1 | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
Solution2 | 30ml | 60ml | 室溫 |
KAC | 30ml | 60ml | 2-8℃ |
End Solution | 4ml | 8ml | 2-8℃ |
自備試劑:50 次自備 36ml 無水乙醇/100 次自備 72ml 無水乙醇/100 次自備 144ml 無水乙醇。
操作步驟:
1. 將估計 DNA 反應液的體積,加入 5 倍體積的 Buffer PG,充分混勻(無需去除石蠟油或礦物油)。 注意:如 DNA 反應體系為 50µl(不包括石蠟油體積),則加入 250 µl Buffer PG。
2. 柱平衡:向已裝入收集管(Collection Tubes)中的吸附柱(Spin Columns)中加入 200μl Buffer
3. PS,12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
4. 將步驟 3 或 4 所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫放置 2 分鐘,12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收 集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
5. 向吸附柱中加入 450 μl Buffer PW(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收 集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
注意:如果純化的 DNA 用于鹽敏感的實驗(例如平末端連接或直接測序),建議加入 Buffer PW 靜置 2-5 分鐘再離心。
6. 重復步驟 4。
7. 12000 rpm 離心 1 分鐘,倒掉收集管中的廢液。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會影響后續的酶促反應(酶切、PCR 等)。 將吸附柱放到一個新的 1.5 ml 離心管(自備)中,向吸附膜中間位置懸空滴加 50μlBuffer EB,室溫放置 2 分鐘。 12000 rpm 離心 1 分鐘,收集 DNA 溶液。-20℃保存 DNA。
注意事項:
1. 使用前應按照試劑瓶標簽的說明在 Buffer PW 中加入無水乙醇。
2. 所有離心步驟均可室溫下進行。
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