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RIPA裂解液(蛋白類)

參  考  價:110 - 160
具體成交價以合同協議為準
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    其他品牌

  • 廠商性質

    生產商

  • 所在地

    上海市

規格

50ml 110元 9999瓶 可售

100ml 160元 9999瓶 可售

更新時間:2023-06-29 12:58:23瀏覽次數:1451次

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供貨周期 現貨 規格 100ml
貨號 T16003 應用領域 醫療衛生,生物產業
RIPA裂解液(蛋白類)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白 樣品可以用于常規的Western、IP等。RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。本產品RIPA裂解液的主要成分為50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS 等。

RIPA裂解液(蛋白類)

產品貨號:T16003

產品規格:100ml

保存條件:運輸 4℃,*保存-20℃

產品簡介:

RIPA裂解液(蛋白類)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA 裂解液裂解得到的蛋白 樣品可以 用于常規的 Western、IP 等。RIPA 的本意是 Radio Immunoprecipitation Assay。本產品 RIPA 裂解液的主要成分為 50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS 等。

操作步驟:

1. 對于培養細胞樣品:

1) 對于貼壁細胞,去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有 干擾, 可以不洗)。按照每 10 7細胞加入 200 微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞 充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。

2) 對于懸浮細胞,離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照每 10 7細胞加入 200 微升裂解液 的比例 加入裂解液。用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,可 適量添加裂解液。

3) 充分裂解后,10000-14000rpm 離心 5-10 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、Western、免疫沉淀和 免疫共沉淀等操作。

2. 對于組織樣品:

1) 把組織剪切成細小的碎片。

2) 按照每 20 毫克組織加入 100-200 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添 加更多 的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)

3) 用玻璃勻漿器冰上勻漿,直至充分裂解。

4) 充分裂解后,10000-14000rpm 離心 5-10 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、Western、免疫沉淀和 免疫共沉淀等操作。

5) 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。 然后同樣離心取上清,用于后續實驗。

注意事項 :

1. 裂解得到的蛋白樣品,由于含有較高濃度的去垢劑干擾,不能用 Bradford 法測定蛋白濃度,可以選用本公司 生產的 BCA 蛋白定量試劑盒測定蛋白濃度。

2. 用戶使用前可根據需要加入蛋白酶抑制劑如 PMSF 或者根據需要再加入 leupeptin,aprotinin 等其它抑制劑。

3. 裂解液中 SDS 4℃保存易沉淀析出,使用前應該 37℃-60℃水浴重新溶解*后回復到室溫使用。

4. 裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或 4℃進行。

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