維生素C檢測試劑盒(磷鉬酸比色法)

產品貨號：R23240

產品規格：50T/100T

產品說明：

   維生素C(Vita minC)又稱L-抗壞血酸，是高等靈長類動物與其他少數生物的必需營養素，在生物體內維生素C是一種抗氧化劑，為酸性己糖衍生物，是稀醇式己糖酸內酯，保護身體免于自由基的威脅，同時也是一種輔酶，其廣泛的食物來源為各類新鮮蔬果。Vc有L-型和D-型兩種異構體，只有L-型的才具有生理功能，還原型和氧化型都有生理活性。

維生素C檢測試劑盒(磷鉬酸比色法)檢測原理是在強酸和偏磷酸的根離子存在條件下，鉬酸銨能與維生素C反應藍色化合物，在一定濃度范圍(樣品濃度控制在25~250μg/ml)，吸光度值與濃度呈線性關系，以分光光度計760nm處檢測吸光度，獲得Vita minC含量。該試劑盒主要用于植物組織中的維生素C(抗壞血酸)的檢測，其優點是：1、反應迅速；2、操作簡便；3、還原糖及其他常見的還原物質對實驗沒有干擾，因此專一性好。

本試劑盒僅用于科研領域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產品組成：

自備材料：

1、蒸餾水

2、離心管或試管

3、離心機

4、水浴鍋或恒溫箱

5、比色杯

6、分光光度計

操作步驟(僅供參考)：

1、稀釋組織勻漿液：按組織勻漿液(5×)：蒸餾水=1：4的比例稀釋，獲得1×組織勻漿液。

2、準備樣品：取待測材料如青菜、水果、松針等，清洗擦干，準確稱量5g，加入研磨器內，再加入少量1×組織勻漿液，研磨碎，留取上清，再次用 1×組織勻漿液研磨，最后

一并倒入50ml離心管，補充1×組織勻漿液至45ml，充分混勻，4000g離心5min，取0.5 ml上清液，加入等量蒸餾水，即為待測液。

3、配制MPA工作液：取一支1.5gMPA粉末，充分溶解于50ml酸性緩沖液中，4℃保存3~4天有效。

4、配制系列Vita min C標準：取干凈離心管或試管，按下表進行操作，依次稀釋。

5、Vita min C加樣：按照下表設置空白管、標準管、測定管，溶液應按照順序依次加入，并注意避免產生氣泡。如果樣品中的Vita min C含量過高，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設置2平行管，求平均值。

6、Vita min C測定：立即混勻，30℃水浴15min，以空白調零，比色杯光徑1cm，以分光光度計測定760nm處系列標準管、測定管的吸光度。

計算：以系列標準Vita min C (25、50、75、100、125、150、200、250μg)為橫坐標，以對應的吸光度為縱坐標，繪制標準曲線，求得回歸方程，以測定管的吸光度代入回歸方程求得維生素C含量。

100g 樣品中維生素C含量(mg)

 =( m0×V1) ×100/[(m1×V2)×1000]=( m0×V1) /[( m1×V2)×10]

式中：  m0 : 根據待測樣品的吸光度值在標準曲線上查出的維生素C的質量(μg)

V1 : 待測液的總體積( ml)

m1 : 樣品質量(g)

V2 : 測定時取樣體積( ml)

1000 : μg換算成mg

注意事項：

1、上述低溫試劑避免反復凍融，以免失效或效率下降。

2、組織勻漿液(5×)久置或低溫保存，容易產生乳白色渾濁；如果白色渾濁不明顯，可以直接使用，不影響效果；如果白色渾濁較多，應棄用。

3、Vita min C Assay buffer 室溫保存時間過長或者過期會出現白色粘稠物，即不可使用，應換新的產品使用。不使用時建議4℃保存。

4、待測樣品如不能及時測定，應置于2~8℃保存，3天內穩定。

5、如果樣品濃度過高，應用蒸餾水稀釋后重測，結果乘以稀釋倍數。

保存條件：

    6個月有效。4℃運輸，4℃保存。

附錄1：標準曲線制作：尚寶在室溫條件下按說明書操作，用分光光度計對系列標準進行吸光度的測定，其數值及標準曲線如下(僅供參考)：