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單鏈 cDNA 的合成2023/4/21
材料與儀器步驟一、材料1.緩沖液、溶液和試劑去除RNA酶的雙蒸水10XRT-PCR緩沖液（去除RNA酶的雙蒸水，100mmol/LTris-HCl、pH8.3，500mmol/LKC1,15mmol/...
從有限的細胞中提取 RNA2023/4/21
材料與儀器LCM帽子乙醇糖原RNA提取試劑盒超純水移液器步驟一、材料1.緩沖液、試劑和溶液75%乙醇(超純水配制）糖原，5mg/ml(Ambion，Austin，TX)StratageneRNA提取試...
細胞融合的方法及誘導物2023/4/19
同種細胞在培養時2個靠在一起的細胞自發合并，稱自發融合;異種間的細胞必須經誘導劑處理才能融合，稱誘發融合。仙臺病毒法融合①兩種細胞在一起培養，加入病毒，在4℃條件下病毒附著在細胞膜上。并使兩細胞相互凝...
大腸桿菌質粒DNA的提取2023/4/19
實驗方法原理堿法提取主要是利用共價閉合環狀質粒與線性染色質在拓撲學上的差異來分離它們。在堿性pH環境，DNA變性，當恢復中性并在高鹽離子濃度時，絕大多數質粒DNA可以準確復性，留在上清中；而線性染色體...
蛋白酶活性檢測方法2023/4/19
1定義1g固體酶粉(或1mL液體酶)，在一定溫度和PH值條件下，1min水解酪素產生1ug酪氨酸為一個酶活力單位，以(u/mL)表示。2福林法(第一法)2、1原理蛋白酶在一琿的溫度與PH條件下，水解底...
植物蛋白質組學和糖基化2023/4/19
1.前言與其他真核細胞一樣，植物細胞中，糖基化通常發生在分泌蛋白質上，雖然在細胞質蛋白和核蛋白上也發現一些糖基化反應。根據寡糖部分和蛋白質骨架之間的連接方式，可將糖基化分為兩種類型：N-糖基化和O-糖...
標記抗體的應用技術2023/4/12
原理ELISA是以免疫學反應為基礎，將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一...
B 淋巴細胞膜表面免疫球蛋白的檢查2023/4/12
原理SmIg是B細胞的抗原識別受體，也是B細胞特異的表面標志，用直接免疫熒光法可檢查出SmIg。用熒光素標記的抗Ig抗體，在一定條件下與淋巴細胞混合，熒光素標記的抗Ig抗體可以與B細胞表面的Ig結合，...
兔多克隆抗血清的制備2023/4/12
材料與儀器抗原PBS乙醇注射針頭注射器培養箱步驟1.取2ml的弗氏完-全佐劑加到2ml的溶于PBS的純化抗原中，使之乳化。用3ml注射器抽取此乳化液，接上22G注射針頭，排出注射器中的氣泡。2.將兔子...
怎么培養好你的細胞2023/4/11
細胞培養是細胞和分子生物學的主要工具之一，提供研究細胞正常生理學和生物化學的優秀模型系統（例如，代謝研究、衰老）、藥物和有毒化合物對細胞的影響，突變和致癌。它還用于藥物篩選和開發，以及大規模生產生物化...
大鼠胰腺移植模型制作2023/4/11
原理成功的胰腺移植能為糖尿病患者或試驗對象提供具有正常功能的胰腺組織，能生理性調節胰島素的分泌，維持正常血糖，阻止甚至逆轉糖尿病并發癥的發生、進展。目前建立的模型多是供胰的靜脈回流采用供體門靜脈與受體...
免疫組織化染色2023/4/10
材料與儀器新鮮組織二甲苯酒精H2O2抗原修復液枸櫞酸鈉緩沖液石蠟福爾馬林PBSDAB蘇木素樹膠丙酮打孔液檸檬酸鈉APES恒溫搖床高壓鍋塑料切片架耐溫玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰凍切片機載玻片步驟一．石蠟...
小鼠灌胃具體操作2023/4/7
小鼠灌胃方法比較簡單，需要關注的只有兩點：一是要保持小鼠的頭部和頸部成一直線，方便灌胃針頭進入，二是動作要輕柔，從口角進入，防止損失食道。做的多了自然就熟練了。具體操作過程如下：1.準備灌胃針頭。一般...
MAPK/ERK信號通路圖及簡介2023/4/7
MAPK,絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinases，MAPKs)是細胞內的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶。研究證實，MAPKs信號轉導通路存在于大多數細胞內，在將...
怎么處理植物組織培養過程中出現的各種污染2023/4/7
1.培養基的配制注意事項植物組織培養經常用到MS培養基，包含十幾種化合物。因為有些化合物相遇會發生化學反應產生沉淀，影響培養基的營養成分，準備MS培養基需要配制多種高倍母液。且配制母液時，尤其涉及大量...
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