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目錄:優利科(上海)生命科學有限公司>>科研試劑盒>>生化試劑盒>> 蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒

蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒
  • 蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒
參考價1600-3000
具體成交價以合同協議為準

參考價:¥1600 ~ ¥3000

具體成交價以合同協議為準
  • YLKBIO 品牌
  • 型號
  • 生產商 廠商性質
  • 上海 所在地
規格

100管/96樣 50管/48樣

屬性

CAS:詳見說明書 純度:詳見說明書 分子量:詳見說明書 分子式:詳見說明書 供貨周期:現貨 規格:100管/96樣、50管/48樣 貨號:YLK-SH128 應用領域:化工,生物產業 主要用途:科研

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規格
100管/96樣3000元201盒可售
50管/48樣1600元214盒可售

更新時間:2024-06-29 15:28:53瀏覽次數:674評價

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CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
供貨周期 現貨 規格 100管/96樣、50管/48樣
貨號 YLK-SH128 應用領域 化工,生物產業
主要用途 科研 測定方法: 微量法、紫外分光光度法
蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒測定意義:SP(EC2.4.1.7) 要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉移到果糖 木糖 半乳糖和鼠李糖等,合成相應的葡萄糖基 聚糖 外,SP 還能催化氫/醌合成熊果苷,具有ji強的美白效果,在化妝品工業中具有重要應用。

蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒說明書

微量法100T/96S

 測定意義:

SP(EC2.4.1.7) 要存在于微生物和植物中,裂解葡萄糖苷鍵,催化葡萄糖基轉移到果糖 木糖 半乳糖和鼠李糖等,合成相應的葡萄糖基 聚糖 外,SP 還能催化氫/醌合成熊果苷,具有ji強的美白效果,在化妝品工業中具有重要應用

 

測定原理:

SP 能夠以磷酸體,催化蔗糖產生 1-磷酸葡萄糖,在葡萄糖磷酸 酶催化6-磷酸葡萄糖,在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶作用還原 NADP+生成 NADPH,導340nm光吸收值增測定 340nm 吸光度增 速率,即可算SP活性                                

 

自備實驗用品及儀器:                                                               

天平溫離心機  恒溫水浴鍋  紫外分光光度  /酶標儀    石英比色皿/96 孔板和蒸餾水                                                                                                

試劑組成和配制:                                                                        

    液體 100mL×1 瓶,4℃保存                                                    

緩沖液  液體 10mL×1 瓶,4℃保存                                                      

試劑一  液體 5mL×1 瓶,4℃保存                                               

試劑二  液體 1.5mL×1 支,4℃保存                                                     

試劑         液體 1mL×1 支,4℃保存                                               

試劑四     粉劑 1 支,-20℃避光保存,臨用前 1mL 蒸水溶解                           

試劑五     粉劑 1 支,-20℃避光保存,臨用前 1mL 蒸水溶解                           

試劑         粉劑 1 支,-20℃避光保存,臨用前 2mL 蒸水溶解                           

試劑七  粉劑 1 支,-20℃避光保存,臨用前 2mL 蒸水溶解                           

 

粗酶液提取:                                                                                  

1.      組按照組質g提液體  (mL)  15~10 的比例 建議約0.1g組,入1mL提液 進行冰浴勻漿,然后 10000g4℃,離心 10min,清測

2.      菌真菌按照胞數104 個提液體mL500~10001 的比例建議500萬胞入1mL提液 ,冰浴超聲波破碎胞率300w,超聲 3         ,間隔7,總時間 3min然后10000g4℃,離心 10min,清置于冰測       

 

測定操作表:

 

1分光光度 /酶標儀預熱 30min,調節波長 340nm 2、操作表

 





對照管


測定管










緩沖液  µL


85


65










試劑一  µL


50


50










試劑二  µL


3


3











試劑

µL


2


2










試劑四  µL


10


10










試劑五  µL


10


10











試劑

µL


20


20










試劑七  µL


20


20


















 

 

混勻,37℃水浴預熱 5min

樣本  µL


20

迅速混勻,于微   石英比色皿/96 孔板,對照管調零,測定 340nm 的初始值 A1,測定完立即放入 37℃水浴準確   2min,對照管調零,迅速測定 340nm 吸光值 A2,△A= A2- A1

 

SP 活性計算公式:

 

a.用微量石英比色皿測定的計算公式

 

1.    按照蛋白濃度 

 

酶活定義  37pH6.8 時,  毫克蛋白質  分鐘催化產生 1nmol NADPH                      一個酶活單

SP 活性  nmol/min/mg   prot  =

?A

÷V ÷Cpr÷T=804×A÷Cpr


×V


ε × d


 

 

2.  按照樣本質            

 

酶活定義  37pH6.8 時,


 

 

克樣本  分鐘催化產生 1nmol NADPH               一個酶活單

 


 

SP 活性  nmol/min/g 鮮重    =

?A

÷(V ÷V 樣總×W)÷T=804×A÷W


×V


ε × d

 

3.    按照  胞數算

 

酶活定義  37pH6.8 時,            104     分鐘催化產生 1nmol NADPH               一個酶活單

SP 活性  nmol/min/104   cell  =

?A

÷(V ÷V 樣總×

胞數

萬個    )÷T=804×


×V


ε × d


 

 

  胞數            萬個

ε       NADPH 摩爾消光系數,6220 L/mol/cm  d  比色皿光  1cm  V

 

  2mL V              應體系中樣本體     0.2mL     W 樣本質  g Cpr


 

 

         應體系總

 

蛋白濃度,mg/mL

 


 

T               應時間,2min

 

b. 96 孔板測定的計算公式

 

1.    按照蛋白濃度 

 

酶活定義  37pH6.8 時,  毫克蛋白質  分鐘催化產生 1nmol NADPH                      一個酶活單

SP 活性  nmol/min/mg   prot  =

?A

÷V ÷Cpr÷T=1608×A÷Cpr


×V


ε × d


 

 

3.  按照樣本質            

 

酶活定義  37pH6.8 時,


 

 

克樣本  分鐘催化產生 1nmol NADPH               一個酶活單

 


SP 活性  nmol/min/g 鮮重    =

?A

÷(V ÷V 樣總×W)÷T=1608×A÷W


×V


ε × d

 

3.    按照  胞數算

 

酶活定義  37pH6.8 時,            104     分鐘催化產生 1nmol NADPH               一個酶活單

SP 活性  nmol/min/104   cell  =

?A

÷(V ÷V 樣總×

胞數

萬個    )÷T=1608×


×V


ε × d

 

  胞數            萬個

ε      NADPH 摩爾消光系數,6220 L/mol/cm  d  比色皿光  0.5cm  V                                應體系總

 

  2mL V              應體系中樣本體     0.2mL     W 樣本質  g Cpr 蛋白濃度,mg/mL

 

T               應時間,2min

 

 

注意事項:

 

1.        粉劑-20保存,配制好的試劑 3 天內使用完

 

2.        可選用 BCA 法測定蛋白含  試劑盒測定蛋白含


蔗糖磷酸化酶(SP)測試盒僅供科研!

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