精品亚洲a∨无码专区毛片-精品亚洲aⅴ无码午夜在线-精品亚洲aⅴ无码午夜在线观看-精品亚洲aⅴ无码一区二区三区-精品亚洲aⅴ无码专区毛片-精品亚洲aⅴ在线

您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)

| 注冊| 產(chǎn)品展廳| 收藏該商鋪

15021281375

products

目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>生化試劑盒>> γ-谷氨酰半胱氨/酸連接酶(GCL)測試盒

γ-谷氨酰半胱氨/酸連接酶(GCL)測試盒
  • γ-谷氨酰半胱氨/酸連接酶(GCL)測試盒
參考價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

參考價(jià):¥ 面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • YLKBIO 品牌
  • 型號
  • 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
  • 上海市 所在地
規(guī)格

屬性

供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:100T/96S 貨號:YLK-SH142 應(yīng)用領(lǐng)域:化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途:科研

>

更新時間:2024-07-10 20:11:13瀏覽次數(shù):667評價(jià)

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

同類優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品

更多產(chǎn)品
供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100T/96S
貨號 YLK-SH142 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 科研 測定方法: 微量法
γ-谷氨酰半胱氨/酸連接酶(GCL)測試盒GCL 是 GSH 合成的限速酶,GSH 對 GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性高低對GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。

γ-谷氨酰半胱氨/酸連接酶(GCL)測試盒說明書

                                             微量法100T/96S

   意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

GCL GSH 合成的限速酶,GSH GCL 有反饋抑制作用。GCL基因表達(dá)受多種因素調(diào)節(jié),如氧化劑、抗氧化劑、生長因子和炎癥因子等。GCL活性高低對GSH含量和GSH/GSSG比值有重要影響。

測定原理:

ATPMg2+存在下,GCL催化谷氨/酸和半胱氨/酸合成γ-谷氨酰半胱氨/酸;同時ATP去磷酸化產(chǎn)生無機(jī)磷分子,通過測定無機(jī)磷增加速率,即可計(jì)算出GCL活性。

自備儀器和用品:

冷凍離心機(jī)、水浴鍋、移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、濃硫酸和蒸餾水。

試劑組成和配制:

試劑一:液體105mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加6 mL蒸餾水充分震蕩溶解。

試劑三:粉劑×1管,4℃保存。臨用前加入蒸餾水1.5 mL充分震蕩溶解。

試劑四:液體7mL×1瓶,室溫保存。

試劑五:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入12 mL蒸餾水,充分震蕩溶解后,緩緩加入400µL濃硫酸(自備),邊加邊攪拌。

粗酶液提取:

1.        組織:按照組織質(zhì)量(g:試劑一體(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4離心10min,取上清,置冰上待測。

2.        細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個):試劑一體積(mL)為500~10001的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g4,離心10min,取上清置于冰上待測。

3.        血清等液體:直接測定。

GCL測定操作:

1.        分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長到660nm,蒸餾水調(diào)零。

2.        空白管:取1.5mLEp管,依次加入試劑一48µL、試劑二52µL、試劑三12µL和蒸餾水24µL,混勻后蓋緊,37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15 min;再加入試劑四60µL,混勻后,室溫(25℃左右)8000g離心10 min,取上清100µL,加入試劑五100µL,混勻后蓋緊,45℃水浴10min,冷卻后測定660nm處光吸收,記為A空白管。

3.        測定管:1.5mLEp管,依次加入試劑一48µL、試劑二52µL、試劑三12µL和上清液24µL,混勻后蓋緊,37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)15 min;再加入試劑四60µL,混勻后,室溫(25℃左右)8000g離心10 min

4.        取上清100µL,加入試劑五100µL,混勻后蓋緊,45℃水浴10min,冷卻后測定660nm處光吸收,記為A測定管。

注意:空白管只需要測定一次。

GCL活性計(jì)算公式:

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.1427xR2=0.9987

a. 使用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

(1). 按蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:37下,每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為1個酶活單位

GCLμg/min /mg prot=[A測定管-A空白管)÷0.1427×V反總]÷(Cpr×V)÷T

=3.815×A測定管-A空白管)÷Cpr

2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:37下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為為1個酶活單位

GCLμg/min /g 鮮重= [A測定管-A空白管)÷0.1427×V反總]÷(W×V÷V樣總)÷T

= 3.815×A測定管-A空白管)÷W

3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

活性單位定義:37下,每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為1個酶活單位

GCLμg/min /104 cell=[A測定管-A空白管)÷ 0.1427×V反總]÷(細(xì)胞數(shù)量×V÷V樣總)÷T

= 3.815×A測定管-A空白管)÷細(xì)胞數(shù)量

4)按照液體體積計(jì)算

活性單位定義:37下,每毫升液體每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為1個酶活單位

GCLμg/min /mL= [A測定管-A空白管)÷ 0.1427×V反總]÷V÷T

=  3.815×A測定管-A空白管)

0.1427:回歸方程系數(shù);V反總:反應(yīng)總體積(mL196 µL=0.196 mLCpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,24µL =2.4×10-2 mLV樣總:提取液體積,1 mLW:樣本質(zhì)量,gT:反應(yīng)時間:15min

b. 使用96孔板測定的計(jì)算公式如下

標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.07135xR2=0.9987

(1). 按蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:37下,每毫克蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為1個酶活單位

GCLμg/min /mg prot= [A測定管-A空白管)÷0.07135×V反總]÷(Cpr×V)÷T

=7.63×A測定管-A空白管)÷Cpr

2)按樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:37下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為為1個酶活單位

GCLμg/min /g 鮮重= [A測定管-A空白管)÷0.07135×V反總]÷(W×V÷V樣總)÷T

= 7.63×A測定管-A空白管)÷W

3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

活性單位定義:37下,每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為1個酶活單位

GCLμg/min /104 cell=[A測定管-A空白管)÷0.07135×V反總]÷(細(xì)胞數(shù)量×V÷V樣總)÷T

= 7.63×A測定管-A空白管)÷細(xì)胞數(shù)量

4)按照液體體積計(jì)算

活性單位定義:37下,每毫升液體每分鐘催化產(chǎn)生1μg無機(jī)磷的GCL酶活量為1個酶活單位

GCLμg/min /mL= [A測定管-A空白管)÷0.07135×V反總]÷V÷T

=7.63×A測定管-A空白管)

0.07135:回歸方程系數(shù);V反總:反應(yīng)總體積(mL196 µL=0.196 mLCpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,24µL =2.4×10-2 mLV樣總:提取液體積,1 mLT:反應(yīng)時間:15min

注意事項(xiàng):

1)樣品處理等過程均需要在冰上進(jìn)行,且須在當(dāng)日測定酶活力,以免影響其活力。如果是勻漿液,避免反復(fù)凍融。

2)所有試劑配制完后,除表明4℃保存外,請于1天內(nèi)用完。

3)實(shí)驗(yàn)過程請帶手套,試劑三中有強(qiáng)腐蝕性物質(zhì),注意不要濺到皮膚上或眼睛內(nèi)。

4)測定吸光值時請于水浴后1040分鐘內(nèi)測完。

5)樣本測定前先取1-2個樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如吸光值太高,應(yīng)先用試劑一(或者生理鹽水)稀釋到適當(dāng)倍數(shù),使得吸光值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi),哺乳動物組織和血液一般稀釋35倍。

6)試劑三配制過程中,可能會產(chǎn)生黑色固體,其不影響結(jié)果,注意吸取時不要將黑色固體吸入。

7)細(xì)胞中GCL活性測定時,細(xì)胞數(shù)目須在300-500萬之間,細(xì)胞中GCL的提取時可加試劑一(或生理鹽水)后研磨或超聲波處理,不能用細(xì)胞裂解液處理細(xì)胞。

γ-谷氨酰半胱氨/酸連接酶(GCL)測試盒僅供科研!


會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言

會員登錄

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗(yàn)證碼

收藏該商鋪

該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:
熱線電話 在線詢價(jià)
主站蜘蛛池模板: 国产成人久久精品推最新| 中文国产一区二区| 亚洲av午夜福利精品一区 | 韩国三级日本三级| 中文字幕乱码熟妇五十中出| 亚洲欧美成aⅴ人在线观看| 精品999久久久久久中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区四区| 动漫精品欧美一区二区三区| 国产一区视频| 无码在线专区| 国产欧美va欧美va香蕉在线| 国产高清免费视频免费观看| 日韩成人黄色| 色窝窝免费播放视频在线| 高潮喷水在线| 男人女人做爰图| 亚洲一区精品视频在线| 2024最新亚洲中文字幕| 久久国产亚洲精品美女久久久久| 一级在线观看| 久久99爱视频| 国产三级精品视频| 亚欧成人中文字| 欧美日韩在线观看一区二区三区| 国产成人一区二区三区影院| 日本无乱码高清在线观看| 精品亚洲国产熟女福利自在线| 波多野结无码高清中文| 老司机午夜网站 | 91蜜桃精品国产91久久| 久久久精品人妻一区二区三区图 | 国产18禁黄网站免费观看| 欧美日韩一区精品一区| 国产福利一区二区三区| 精品无码久久久久久久动漫| 精品久久久久久不卡精品小说| 亚洲午夜成人精品| 亚洲精华国产精华精华| 国产精品理论在线无码| 日韩国产日韩欧美|