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參考價 | ¥1080-¥1750 |
參考價:¥1080 ~ ¥1750
100管/96樣 50管/48樣
CAS:詳見說明書 純度:詳見說明書 分子量:詳見說明書 分子式:詳見說明書 供貨周期:現貨 規格:100管/96樣、50管/48樣 貨號:YLK-SH117 應用領域:化工,生物產業 主要用途:科研
>100管/96樣 | 1750元 | 118盒 可售 |
50管/48樣 | 1080元 | 99盒 可售 |
更新時間:2024-06-29 15:51:12瀏覽次數:763評價
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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現貨 | 規格 | 100管/96樣、50管/48樣 |
貨號 | YLK-SH117 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
主要用途 | 科研 | 測定方法: | 微量法、可見分光光度法 |
乙醇含量測定試劑盒說明書
微量法100管/96樣
注 意:正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
酒是含酒精(乙醇)飲料的統稱,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒質量的重要指標之一。我國是世界上Z早發明釀酒的國家,也是酒類產品消費大國,其消費量居世界zhi首。因此,快速、準確測定酒中乙醇含量,對于確保酒的質量和保護消費者的健康具有重大意義。
測定原理:
乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,同時,NAD 被還原生成 NADH,NADH 在 1-mPMS 的作用下使 WST-8 顯橙黃色,通過 450 nm 下測定吸光值變化可測得乙醇含量。
需自備的儀器和用品:
酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96 孔板、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制:
試劑一:液體 12 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1 瓶, -20℃保存;臨用前加入 6 mL 試劑三充分溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;
試劑三:液體 10 mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:液體 1.5mL×1 管, 4℃避光保存。
乙醇提取:
1. 組織:按照組織質量(g):蒸餾水體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 蒸餾水),進行勻漿,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。
2. 細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):蒸餾水體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 蒸餾水),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次), 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。
3. 血清(漿)等液體樣品:直接測定。
測定步驟:
1. 酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 450nm。
2. 工作液的配制:臨用前按照樣本數量,按以下比例配制工作液
試劑名稱 體積(μL)
試劑一 100
試劑二 50
試劑四 10
3. 樣本測定
按下表在 96 孔板中加入如下試劑
試劑名稱 體積(μL)
樣本 40
測定工作液 160
混勻后記錄 450nm 下測定初始吸光值 A1,和 37℃避光孵育 10min 后的吸光值 A2,計算△A=A2-A1。
乙醇含量計算:
標準條件下測定回歸方程為 y = 0.0256x + 0.0055 | R2 = 0.9991; |
x 為乙醇含量(μmol/mL),y 為吸光值差值△A。
1. 按照血清(漿)體積計算
乙醇含量(μmol/mL)= (△A-0.0055)÷0.0256
=39.1×(△A-0.0055)
2. 按照樣品質量計算
乙醇含量(μmol/g 鮮重)= [ (△A-0.0055)÷0.0256×V1]÷(W ×V1÷V2)
= 39.1×(△A-0.0055)÷W
3. 按照細菌或細胞密度計算
乙醇含量(μmol/104 cell)= [ (△A-0.0055)÷0.0256×V1]÷(500×V1÷V2)
=0.078×(△A-0.0055)
V1:加入反應體系中樣本體積,0.04mL;V2:加入提取液體積,1 mL; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬;
注意事項:
測定前取 1-2 個樣做預實驗,若△A﹥0.3 或乙醇含量﹥10μmol/mL,需將樣本用蒸餾水稀釋后再測定,以確保測定的準確性。
Z低檢測限:0.02μmol/mL。
乙醇含量測定試劑盒僅供科研!