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上海尚寶生物科技有限公司
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動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒

參  考  價(jià):280 - 520
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 型號(hào)

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    生產(chǎn)商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

50T 280元 999盒可售

100T 520元 999盒可售

更新時(shí)間:2021-08-24 17:21:36瀏覽次數(shù):215次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T/100T
貨號(hào) 26221 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng),提取革蘭氏陽性菌基因組DNA。離 心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司*新型材料,能夠高效專一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞 中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。

動(dòng)物組織/細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒

產(chǎn)品貨號(hào):26221

 產(chǎn)品規(guī)格:50T/100T 

產(chǎn)品簡介:本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng),提取革蘭氏陽性菌基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司*新型材料,能夠高效專一吸附DNA,可最大限度去除雜質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組DNA片段大,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的基因組DNA可用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。 


產(chǎn)品組成:試劑名稱 50T 100TRNase A 1ml 1ml×2蛋白酶 K 1ml 1ml×2溶液 A 10ml 20ml溶液 B 10ml 20ml漂洗液 15m1 15ml×2洗脫液 10m1 20m1吸附柱 50 個(gè) 100 個(gè)收集管 50 個(gè) 100 個(gè) 


操作步驟:使用前請(qǐng)先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶體上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。 

  1. 樣品的處理:

    a、細(xì)胞:取 1×106 -1×107 個(gè)懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,12000rpm 離心 1min 收集細(xì)胞,貼壁細(xì)胞先用胰蛋白酶消化處理,再用預(yù)冷的 PBS 吹打成細(xì)胞懸液,然后 12000rpm 離心 1min 收集細(xì)胞,盡量除去上清,加 200ul 溶液 A,振蕩至*混勻。

    b、組織:組織量不宜過大,一般不要超過 25mg,可以使用勻漿器勻漿,最好用液氮研磨成粉末狀,再用預(yù)冷的PBS 或無菌水充分懸浮,然后 12000rpm 離心 1min 收集細(xì)胞,盡量除去上清,加 200ul 溶液 A,振蕩至*混勻。

    2. 向懸浮液中加入 20ul 的 RNase A (10mg/ml),55℃放置 15min。

    3. 加入 20ul 的蛋白酶 K( 10mg /ml ),充分顛倒混勻,55℃水浴消化,細(xì)胞消化時(shí)間較短,組織消化時(shí)間較長,一般需要 1-3 個(gè)小時(shí)才能完成(鼠尾需要消化過夜)。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,直至樣品消化*為止。 消化*的指標(biāo)是:液體清亮及粘稠。

    4. 加入 200ul 體積溶液 B,充分顛倒混勻,如出現(xiàn)白色沉淀,可放置于 75℃15-30min,沉淀即會(huì)消失,不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮,說明樣品消化不*,可能導(dǎo)致提取的 DNA 量少及不純,還有可能導(dǎo)致堵塞吸附柱。5. 加入 200ul 無水乙醇,充分混勻,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響 DNA 的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中。

    6. 12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

    7. 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇), 12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

    8. 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。

    9. 12000rpm 離心 2min,將吸附柱敞口置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會(huì)影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)如酶切、PCR 等。

    10. 將吸附柱放入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜中央懸空滴加 50-200ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm 離心 2min。

    11. 可將離心所得洗脫液再加入吸附柱中,12000rpm 離心 2min,即可得到高質(zhì)量的基因組 DNA。

    注意事項(xiàng):

    1. 試劑盒拆封后,RNase A 和蛋白酶 K 需放置-20℃保存

    2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。

    3. 如果試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在 65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響效果。

    4. 洗脫緩沖液的體積最好不少于 50ul,體積過小會(huì)影響回收效率:洗脫液的 pH 值對(duì)洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 將水的 pH 值調(diào)至此范圍),pH 值低于 7.0 會(huì)降低洗脫效率。

    保存條件:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期 12 個(gè)月,2-8℃保存時(shí)間更長。


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