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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 50T/100T |
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貨號 | 11020 | 應用領域 | 化工,生物產業 |
大腸桿菌基因組DNA提取試劑盒(CTAB沉淀法)
產品貨號:11020
產品規格:50T/100T
產品簡介:
大腸桿菌( Escherichia coli,E.coli)屬于革蘭氏陰性短桿菌,大小0.5×1~3微米周生鞭毛,能運動,無芽孢,能發酵多種糖類產酸、產氣,是人和動物腸道中的正常棲居菌,嬰兒出生后即隨哺乳進入腸道,與人終身相伴,幾乎占糞便干重的1/3.獲得DNA的量很高,但是純度一般,但足夠用于大多數分子生物學實驗。
大腸桿菌基因組DNA提取試劑盒CTAB沉淀法是簡便的利用CTAB取大腸桿菌基因組DNA的試劑盒,其提取原理是利用蛋白酶K消化蛋白,CTAB沉淀多糖,再經加熱使蛋白變性與DNA分離,乙醇沉淀核酸獲得基因組DNA,可進行酶切、PCR等下游實驗。該試劑盒僅用于科研領域,不用于臨床診斷或治療。
產品組成:
產品名稱 | 50T | 100T | 儲存條件 |
試劑(A):蛋白酶K | 10mg | 10mg | 室溫 |
試劑(B):Eco裂解液 | 1.5ml | 2×1.5ml | 室溫 |
試劑(C):CTAB沉淀液 | 10ml | 20ml | 室溫 |
試劑(D):蛋白清除液 | 50ml | 100ml | 4℃,避光 |
試劑(E):Eco漂洗液 | 100ml | 200ml | 室溫 |
試劑(F):TE buffer | 50ml | 100ml | 室溫 |
操作步驟:
1. 準備工作:取TE buffer,加至蛋白酶K中,充分混勻,配制成20mg/ml的白酶K溶液,可分裝成小份,20保存1年有效。
2. 取菌液置于EP管中,離心,棄上清液。再次加入1.5m菌液,重復該步驟一次。
3. 加入Eco裂解液和3μl白酶K溶液(20mg/ml),充分混勻,37℃孵育1h。
4. 加入CTAB沉淀液,充分混勻,65℃孵育10min
5. 加入780蛋白清除液,充分混勻,12000g離心5~10min
6. 轉移上清至新EP管中,加入2倍體積的Eco漂洗液,混勻,20℃放置30min或過夜。
7. 13000g離心10min,棄上清液,加入70%乙醇洗滌沉淀
8. 13000g離心10min,棄上清液,室溫干燥DNA沉淀,加入100或適量 TE buffer溶解沉淀,20℃保存。 TE buffer體積越大,DNA濃度越低。
注意事項:
1. 用于裂解的噬菌體、宿主菌越新鮮,裂解越好,收獲量越大。
2. 為了您的安全和健康,請穿戴一次性手套操作。
有效期:6個月有效。
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