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供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	50T/100T
貨號	26227	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)

　　規(guī)格參數(shù)：

　　英文名稱:Gram-positiveBacteriumPlasmidExtractionMaxiKit

　　儲(chǔ)存條件:酶附件-20℃，其它試劑RT，復(fù)檢期1年

　　單位:盒

　　規(guī)格:10T

　　本試劑盒先用溶菌酶處理,再用堿裂解法裂解細(xì)胞,通過吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結(jié)合溶液中的DNA的特性提取質(zhì)粒DNA。吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料能高效、專一地吸附DNA,可大限度去除雜質(zhì)蛋白質(zhì)及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。從1-5ml培養(yǎng)液中,可快速提取5-15μg純凈地高拷貝質(zhì)粒DNA,提取率達(dá)85-90%。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學(xué)試驗(yàn),包括酶切、PCR、測序、連接和轉(zhuǎn)化等試驗(yàn)。本試劑盒無需使用酚、氯仿等有毒試劑,操作安全。

　　注意事項(xiàng):

　　1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入),混勻,置于2-8℃保存。

　　2、第一次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。

　　3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現(xiàn)混濁,如有混濁現(xiàn)象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復(fù)澄清后再使用。

　　4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子,如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)室溫下進(jìn)行離心。

　　5、如果是提取革蘭氏陽性菌質(zhì)粒,必須在裂解細(xì)胞前破細(xì)胞壁,方法如下:收集適量菌體,加入250ul溶液Ⅰ充分懸浮菌體,加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml,37℃處理30min左右。加入溶菌酶的濃度和處理時(shí)間可根據(jù)不同的菌株和具體試驗(yàn)條件進(jìn)行調(diào)整。

　　6、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,體積過小會(huì)影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調(diào)至此范圍),pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。