ATP檢測試劑盒

產(chǎn)品貨號：BA1799

產(chǎn)品規(guī)格：200次

產(chǎn)品簡介：

ATP檢測試劑盒(ATP Assay Kit)可以用于檢測普通溶液、細(xì)胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。細(xì)胞和組織樣品一步裂解即可完成樣品制備，檢測靈敏度高達(dá)1nM，化學(xué)發(fā)光可以持續(xù)穩(wěn)定達(dá)30分鐘，并且獲得的樣品還可以同時進(jìn)行Western檢測。

ATP，作為最重要的能量分子，在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變，會影響細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下，ATP水平會下降；而高葡萄糖刺激等可上調(diào)某些細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降，在細(xì)胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發(fā)生。

本試劑盒根據(jù)螢火蟲螢光素酶(firefly luciferase，也稱熒光素酶)催化螢光素產(chǎn)生螢光時需要ATP提供能量研制而成。當(dāng)螢火蟲螢光素酶和螢光素都過量時，在一定的濃度范圍內(nèi)螢光的產(chǎn)生和ATP的濃度成正比。這樣就可以高靈敏地檢測溶液中的ATP濃度。

樣品制備簡單。本試劑盒提供了可以用于細(xì)胞和組織裂解的ATP檢測裂解液，簡單裂解后即可用于ATP檢測。無需進(jìn)行高氯酸或三(TCA)抽提，或樣品裂解后的煮沸等繁瑣操作。

靈敏度高，線性范圍寬，在1nM至10μM范圍內(nèi)有良好檢測效果。本試劑盒在樣品體積為100微升時可以檢測濃度低達(dá)1nM的ATP。而常規(guī)的細(xì)胞或組織裂解液中ATP的濃度為0.1-1μM，一些常見細(xì)胞的細(xì)胞內(nèi)ATP水平約為10nmol/mg蛋白。并且本試劑盒的檢測濃度范圍非常寬，檢測上限可以高達(dá)10μM，并在1nmol/L-10μM范圍內(nèi)可以形成良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

讀數(shù)穩(wěn)定。本試劑盒進(jìn)行了特殊的優(yōu)化設(shè)計(jì)，使檢測ATP時的化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定。對于ATP標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測結(jié)果顯示，在開始反應(yīng)后10分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光無明顯下降，開始反應(yīng)后30分鐘內(nèi)化學(xué)發(fā)光的下降不超過10%。

制備的樣品兼容性好。使用本試劑盒中的ATP檢測裂解液裂解獲得的細(xì)胞或組織樣品，不僅可以用于ATP檢測，還可用于檢測蛋白濃度、進(jìn)行SDS-PAGE或一些常規(guī)的較易溶解蛋白的Western檢測。

使用方便快捷。通常10-20個樣品可以在30-60分鐘內(nèi)測定完畢。

產(chǎn)品組成：

注意事項(xiàng)：

1. ATP檢測試劑中含有熒光素酶，反復(fù)凍融會導(dǎo)致其逐漸失活。盡管經(jīng)測試ATP檢測試劑反復(fù)凍融5次對于其檢測效果無明顯影響，為取得較好的使用效果，建議用戶使用時的凍融次數(shù)不宜超過3次。ATP檢測試劑稀釋成ATP檢測工作液后，最好一次用完，不宜凍存后再使用。

2. ATP，特別是裂解后樣品中的ATP在室溫不太穩(wěn)定，需在4℃或冰上操作。ATP在冰上可以穩(wěn)定長達(dá)6小時。

3. 本試劑盒需使用luminometer，即化學(xué)發(fā)光儀(檢測熒光素酶報告基因時所用的儀器)。如果沒有luminometer，也可以使用液閃儀。液閃儀的測定效果取決于液閃儀的檢測靈敏度和檢測精度。

4. 使用可檢測化學(xué)發(fā)光的多功能酶標(biāo)儀時，所用96孔板宜為孔和孔之間不透光的黑板或白板。如使用常規(guī)的透明96孔板，需特別注意正確設(shè)置酶標(biāo)儀測定時板子的類型，同時也可以在檢測孔之間設(shè)置間隔孔，以盡量避免鄰近孔之間的相互干擾。

5. 本試劑盒提供的ATP檢測裂解液可以有效裂解并釋放常見的培養(yǎng)細(xì)胞和組織中的ATP。對于一些特殊的組織或樣品，如果發(fā)現(xiàn)檢測出來的ATP水平顯著低于預(yù)期水平，可以在裂解樣品后并且在離心前，取部分樣品煮沸2分鐘以充分釋放ATP。煮沸后樣品中的蛋白會變性，從而會在后續(xù)的離心步驟中被沉淀，因此煮沸的樣品不能用于蛋白濃度測定、SDS-PAGE和Western檢測。可以使用剩余的部分樣品進(jìn)行蛋白濃度測定、SDS-PAGE和Western檢測。

6. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

7. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

保存條件：
    -20℃保存，半年有效。-70℃保存，一年有效。ATP檢測試劑需避光保存。