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常見細胞污染類型及預防辦法2022/1/4
凡混入細胞培養環境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為污染，細胞污染不能*被消除，但能減少其發生的頻率和后果的嚴重性。本文將簡要介紹幾種常見的細胞污染類型及處理方法。常見污染類型細菌污染...
HK-2細胞出現空泡是正常的嗎？2022/1/4
建系背景人腎皮質近曲小管上皮細胞系HK-2，取自正常成人腎臟的永生化近端小管上皮，通過轉入HPV-16E6/E7基因構建而成，并在無血清培養基中持續生長了一年多。HK-2的生長依賴于表皮生長因子EGF...
認識黑膠蟲的真面目（上）2022/1/4
江湖上流傳很久的黑膠蟲，到底真實身份是啥？今天讓我們一起來扒一扒~我們收集了全國29個黑膠蟲污染樣本進行DNA提取、測序、數據庫比對，得到了鑒定結果，一起和大家分享一下吧。表：黑膠蟲檢定微生物種屬樣本...
細胞的必須檢查，你有做過嗎？2022/1/4
文章描述了一個典型的工作流程，與細胞操作需要注意的必要步驟，為了成功地應用哺乳動物細胞系，它們必須在受控的條件下生長，并需要自己特定的生長介質。此外，為了保證一致性，必須定期監測它們的生長情況。當細胞...
IPS細胞怎么誘導分化？2022/1/4
IPSC生成通常是實現真正的實驗目標的中間步驟。它一般應用于：人胚胎發育建模；作為難以分離的細胞來源，用于基礎研究和疾病建模；藥物篩選應用；細胞替代治療。IPS神經分化的protocol，以下是神經細...
細胞凍存相關實驗操作詳解2021/12/27
一、怎樣凍存動物細胞?一個實驗室得到一個新的細胞株后，首先要把該細胞株培養擴增后凍存起來。細胞凍存首先可以在由于污染等情況丟失細胞時有備份可用，另外幾乎所有細胞在培養傳代的過程中發生一定程度的變異，為...
CaCl2 法制備感受態細胞2021/12/24
材料與儀器【器材】1．培養皿2．恒溫培養箱【試劑】1．LB培養基2．選擇性LB瓊脂培養平板（含氨芐青霉素，終濃度為50μg/ml）3．氨芐青霉素100mg/ml4．宿主細菌：經100mmol/LCaC...
牙簽法小量制備質粒DNA實驗2021/12/24
原理用牙簽從瓊脂培養基上挑取的菌落可直接用于制備質粒DNA。所得的閉合環狀DNA往往雜質太多，不能作為大多數限制酶的底物。材料與儀器抗生素溴酚藍溶液EDTA溴化乙錠NSS溶液KCl瓊脂糖凝膠LB、YT...
制備YAC DNA進行Southern印跡分析2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCSCESCEMTris·ClEDTATE乙酸甲RNaseA異丙醇NaCl培養箱離心管轉子步驟1.接種一個紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20mlAHC培養基的250ml三角燒瓶...
YAC 克隆的分析實驗 實驗庫 參考來源：2021/12/24
材料與儀器酵母菌AHCYPD甘油培養箱冷凍管步驟1.用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養，直至長出1~3mm大小的紅色菌落為止。2.短期保存：用P...
熒光原位雜交技術2021/12/24
原理用已知的標記單鏈核酸為探針，按照堿基互補的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列，因而可以探針直接與染色體進行...
細胞傳代培養實驗常見問題詳解2021/12/23
01一般拿到細胞后，應該注意什么?收到細胞先不開蓋,用酒精將整個細胞瓶外壁進行消毒，放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時的培...
細胞培養常遇問題集錦（十七）2021/12/23
細胞培養問題集錦第十七期，小編會繼續收集相關問題，每期都為大家更新5個細胞培養中遇到的問題并解答~81、▲問：hepg2細胞有很多小球聚集到一起，這是污染還是沒有吹開的細胞？是不是念珠菌感染？出不來形...
細胞培養常遇問題集錦（十六）2021/12/23
細胞培養第十六期來了，今后也會陸續為大家更新，一起來看看吧~76、▲問：這是酵母菌感染嗎？一般會通過什么途徑污染？答：是酵母菌污染，像圈起來的連體結構就是。一般是環境和操作等途徑污染。問：用新潔爾滅擦...
細胞培養常遇問題集錦（十五）2021/12/23
本次更新第十五期細胞培養常遇問題集錦，大家一起來看看有沒自己培養細胞時遇到的問題吧~71、問：凍存細胞放在4°最多可以放多久呀？如不小心忘記了大概放4°放了3個小時還可以用嗎？答：問題不大，有復蘇過這...
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